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0240-8813
parution suspendue
An international journal of food science and technology
 

 ARTICLE VOL 22/1-2 - 2002  - pp.33-44  - doi:10.3166/sda.22.33-44
TITRE
Quantification de bactéries lactiques par PCR quantitative

TITLE
Identification and quantification of lactic acid bacteria by real time quantitative PCR assay.

RÉSUMÉ

Après un bref rappel du principe de la PCR quantitative en temps réel, nous montrons que cette technique peut être un outil de choix pour identifier et quantifier des bactéries présentes dans les produits laitiers commerciaux.
La PCR quantitative en temps réel a été utilisée pour détecter et quantifier les espèces de bactéries lactiques suivantes : Lactobacillus acidophilus, Lactobacillus johnsonii, Lactobacillus delbrueckii ssp. bulgaricus et Streptococcus thermophilus. Des amorces spécifiques de chaque espèce ont été choisies pour cibler la région variable V3 de l’ADN ribosomique 16S (ADNr 16S). La robustesse du test a été évaluée à partir d’ADN extrait de cultures de souches pures : la spécificité et la sensibilité de la méthode ont été testées sur des laits fermentés commerciaux. La comparaison des résultats de dénombrement sur milieux gélosés avec ceux obtenus par PCR montre une bonne corrélation entre les deux méthodes.

ABSTRACT

After a brief review of the principles of the real time quantitative PCR method, we present an application of this technique as a powerful tool to identify and quantify lactic acid bacteria in commercial fermented milks. Real time quantitative PCR was used to detect and quantify the following lactic acid bacteria: Lactobacillus acidophilus, Lactobacillus johnsonii, Lactobacillus delbrueckii ssp. bulgaricus and Streptococcus thermophilus. To each species, specific primers were designed to target the variable V3 region of 16S rDNA. The limits of the assay were tested using DNA extract from pure culture. The sensitivity and specificity of the system were also tested using commercial fermented milk. A comparison of results of plate counts and the real time quantitative PCR is in a good agreement.

AUTEUR(S)
Jean-Pierre FURET, Pascal QUENÉE, Patrick TAILLIEZ

MOTS-CLÉS
Lactobacillus, Streptococcus, ADN ribosomique 16S, PCR quantitative en temps réel, laits fermentés.

KEYWORDS
Lactobacillus, Streptococcus, 16S ribosomal DNA, real time quantitative PCR, fermented milk.

LANGUE DE L'ARTICLE
Français

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