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parution suspendue
An international journal of food science and technology
 

 ARTICLE VOL 20/1 - 2000  - pp.55-62  - doi:10.3166/sda.20.55-62
TITRE
Évaluation de la diversité de l'expression génétique chez les lactocoques : développement d'un outil et son application aux peptidases

RÉSUMÉ

L'expression d'un gène dépend en partie de l'efficacité de son promoteur. Elle peut varier en fonction de facteurs environnementaux et du contexte génétique. Au sein de souches d'une même espèce, les facteurs cellulaires influant sur la transcription peuvent être variables et reflètent la diversité génétique. Il existe peu d'outils génétiques chez les lactocoques qui permettent d'étudier la variabilité de l'expression des gènes et nous avons donc développé une série de vecteurs permettant de mesurer la transcription des gènes. Ces vecteurs contiennent un gène rapporteur codant pour la luciférase bactérienne, dont l'activité peut être mesurée par émission de lumière dans différents milieux, comme le lait ou des environnements naturels. De plus, ces vecteurs sont faci * Laboratoire de génétique microbienne, Institut national de la recherche agronomique, 78352 Jouy-enJosas cedex, France. Correspondance guédon@biotec.jouy.inra.fr lement intégrables dans le chromosome des lactocoques et transférables par conjugaison. L'analyse de la transcription des gènes codant pour des peptidases de Lactococcus lactis par des fusions transcriptionnelles montre que la plus forte expression est obtenue avec les promoteurs des gènes codant pour des aminopeptidases générales. En prenant le promoteur de pepC comme exemple, nous avons montré que ces vecteurs sont bien adaptés à l'étude de la variabilité de l'expression des gènes dans différentes souches de L. lactis. Mots clefs : Lactococcus lactis, peptidase, promoteur, variabilité.

ABSTRACT

Evaluation of the genetic expression diversity in lactococci, development of tools and peptidases application. The expression of a gene depends primarily, on the activity of its promoter. It can vary as a function of several parameters such as environmental conditions and cellular factors. The cellular factors are sometimes different in independent isolates as a result of the genetic diversity. Few genetic tools are available in lactococci to study the variability of gene expression and we have thus developed vectors for this purpose. These vectors contain bacterial luciferase as reporter genes. The luciferase activity can be followed by light emission in milk or other natural media. Moreover, these vectors can be integrated on the chromosome in lactococci and are easily transferable by conjugation. Transcriptional fusions with peptidase promoters of Lactococcus lactis have shown that general aminopeptidase gene promoters have stronger transcription than other promoters. The versatility of these genetic tools to study the variability of gene expression in Lactococcus lactis is presented via the study of the pepC promoter.

AUTEUR(S)
Eric GUÉDON, Pierre RENAULT, Stanislav Dusko EHRLICH, Christine DELORME

Reçu le 22 décembre 1998.    Accepté le 25 août 1999.

MOTS-CLÉS
Lactococcus lactis, peptidase, promoteur, variabilité.

KEYWORDS
Lactococcus lactis, peptidase, promoter, variability.

CITATIONS
sda.revuesonline.com/revues/3/citation/1841.html

LANGUE DE L'ARTICLE
Français

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